4 de agosto de 2022

PARTICIPACIÓN DEL RECEPTOR DE GLUCOCORTICOIDES EN LA DIFERENCIACIÓN CELULAR INDUCIDA POR ÁCIDO RETINOICO

Dra. LUCIANA ROCHA VIEGAS. Investigadora Adjunta CONICET - IFIBYNE-UBA-CONICET; JTP FCEyN-UBA. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias (IFIBYNE) UBA-CONICET.

Información de la línea de investigación: https://ifibyne.fcen.uba.ar/grupo-rocha-viegas/

Resumen del seminario
El grupo de investigación estudia la relevancia del receptor de glucocorticoides (GR) sobre la diferenciación celular mediada por el receptor del ácido retinoico (RAR). Utilizan como modelo experimental líneas celulares indiferenciadas de leucemia mieloide aguda, en las cuales la diferenciación celular inducida por el ácido retinoico se potencia significativamente luego del agregado de esteroides. Mediante el análisis de perfiles transcripcionales y ensayos de accesibilidad de cromatina, evalúan la regulación conjunta de la expresión génica dada por los receptores nucleares GR y RAR durante la diferenciación celular.

Resultados discutidos
-Se caracterizaron los complejos proteicos del RAR durante la diferenciación celular, usando la línea celular u937. GR forma complejos con los co-factores del RAR, entre ellos la proteína ASH2L.
-Se analizaron las vías de señalización, autorrenovación y la vía AP-1NFƙB-TNF reguladas con RA y DEX, durante la diferenciación celular.
-Se analizaron que genes son potenciados o antagonizados por los complejos formados por el GR y el RAR.
-A partir de un ensayo de citometría de flujo, midiendo marcadores celulares, se concluyó que la dexametasona aumenta la diferenciación celular y en presencia de RA este efecto se potencia. Además, se midió el nivel de clonogenicidad de las células, con dexametasona disminuye y al agregar RA, también se potencia este efecto.
-Mediante un ensayo de accesibilidad de cromatina, se concluyó qué la accesibilidad de la cromatina no es afectada por dexametasona durante la diferenciación inducida por RA. Se concluyo que el GR se encuentra asociado a zonas distales y no promotoras. El GR se asocia a genes pro-diferenciación y genes anti-renovación.
-A partir de un ensayo con vectores retrovirales, en el cual se realizó una mutación en el dominio de unión al DNA del GR (DBD) y se lo comparo con un GRwt en ensayos de diferenciación, en presencia de RA y DEX, se concluyó que no es necesaria la unión al DNA del GR para potenciar la diferenciación celular. GR no se une al DNA directo, lo hace por factores de transcripción o co-factores.
-A partir de un ensayo de inmunofluorescencia, en células NB4, se estudió como se distribuyen el RAR y el GR en el núcleo. Además, en presencia de RA hay una reorganización de cuerpos nucleares PML (Proteína de la leucemia promielocítica).
-El grupo de investigación va a empezar a estudiar si en otros tipos celulares que se diferencian con RA se observa potenciación con dexametasona, empezaron estudios con las células neuronales NT2.

Relevancia Patológica
- Estudiar la relevancia del receptor de glucocorticoides (GR) sobre la diferenciación celular mediada por el receptor del ácido retinoico (RAR) en líneas celulares que se diferencian con RA.
- Caracterizar genes y vías de señalización dónde se encuentren implicados los complejos formados por el GR y el RAR.

Papers relevantes
Rocha-Viegas L, Silbermins M, Ogara MF, Pellegrini JM, Nuñez SY, García VE, Vicent GP, Pecci A. Glucocorticoids uncover a critical role for ASH2L on BCL-X expression regulation in leukemia cells. Biochim Biophys Acta Gene Regul Mech. 2020 Jan;1863(1):194475.