INTEGRANTES

ROXANA NOEMÍ PERONI

Investigadora Asistente- Carrera del Investigador Científico y Tecnológico del CONICET.

Jefa de Trabajos Prácticos  - Cátedra de Farmacología, Departamento de Farmacología, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires.

ANDREINA QUEVEDO

Becaria doctoral, CONICET.

NATALIA POZNANSKI

Becaria doctoral, UBA.

 

LINEAS DE INVESTIGACIÓN

BÚSQUEDA DE INHIBIDORES DE LAS PROTEÍNAS TRANSPORTADORAS ABC EN PRODUCTOS NATURALES: USO POTENCIAL COMO AGENTES RESENSIBILIZANTES EN QUIMIOTERAPIA

Esta línea de investigación se enfoca en la búsqueda de nuevos inhibidores potentes, selectivos y seguros de los transportadores ABC que influencian la biodisponibilidad de fármacos y que se asocian con fenómenos de resistencia a fármacos (MDR) en cáncer y otras patologías.

Los metabolitos secundarios presentes en productos vegetales consumidos por humanos con capacidad de inhibir transportadores ABC asoman como coadyuvantes promisorios en la quimioterapia contra el cáncer, ya que podrían ser útiles para revertir la MDR.

En nuestro grupo de trabajo observamos que la ingesta crónica de hojas de rúcula (variedades Eruca vesicaria y Diplotaxis tenuifolia) y los extractos de Cannabis sativa poseen actividad anti- proliferativa, así como también la capacidad de inhibir la actividad de los transportadores ABC involucrados en fenómenos de MDR, como P-gp y BCRP.

Por ello, tenemos el objetivo de profundizar el estudio de la interacción de estos compuestos naturales con los transportadores ABC a nivel molecular a través de un abordaje in vitro, a nivel molecular en cultivo 2D y 3D de células tumorales humanas provenientes de carcinoma hepático, carcinoma colorrectal y cáncer de mama.  Nos proponemos validar un biométodo que permita realizar un cribado de la actividad de compuestos aislados del material vegetal. Todo ello con el propósito de generar conocimiento genuino que contribuya a la descripción y validación de nuevos blancos terapéuticos para el tratamiento del cáncer que permitan desarrollar novedosos prototipos farmacológicos más selectivos y eficaces mediante diseño racional.

 

PARTICIPACIÓN DE LOS TRANSPORTADORES OATP4C1 Y MRP4 EN LA PROGRESIÓN DE LA POLIQUISTOSIS RENAL AUTOSÓMICA DOMINANTE (ADPKD) Y SU CORRELATO CON LOS NIVELES DE AMPc URINARIO: BÚSQUEDA DE BIOMARCADORES TEMPRANOS DE PROGRESIÓN

Esta línea de investigación barca un estudio clínico, prospectivo, observacional y no intervencionista en colaboración con el Laboratorio de Nefrología del Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari (IDIM, UBA-CONICET). La ADPKD se caracteriza por un agotamiento intracelular de calcio debido a la actividad deficiente del complejo de policistina 1 o 2 que, a su vez, estimula la producción de AMPc por adenilato ciclasas e inhibe su degradación por las fosfodiesterasas. Sin embargo, los factores que alteran el comportamiento del AMPc en la progresión de la enfermedad no están completamente dilucidado. A su vez, las vesículas liberadas al exterior celular (EVs) juegan un papel esencial en la comunicación célula-célula y son una herramienta emergente como biomarcadores de progresión de enfermedades renales. Las EVs urinarias aparecen como una herramienta accesible para medir parámetros intracelulares como el AMPc.

El objeto de esta línea es determinar si el monitoreo del AMPc urinario libre o en EVs, así como de los transportadores MRP4 y OATP4C1 renales, en el sedimento urinario o en EVs, permite predecir tempranamente la progresión a la falla renal crónica terminal en pacientes ADPKD. A su vez, la evaluación de la funcionalidad de MRP4 y OATP4C1 renales a nivel in vitro en cultivos celulares nos permitirá dilucidar si constituyen potenciales blancos terapéuticos.ras (Total Exosome Isolation Reagent from urine, Invitrogen™ 4484452).

 

DESARROLLO Y VALIDACIÓN DE UN MÉTODO MAGNÉTICO COSTO-EFECTIVO DE ASILAMIENTO DE VESÍCULAS EXTRACELULARES PARA APLICACIONES EN NEFROPATOLOGÍAS PROLIFEARTIVAS A NIVEL CLÍNICO

Los exosomas son vesículas extracelulares cuyo tamaño se encuentra comprendido entre los 30 y los 150 nm. Se originan en el complejo endosomal y su composición puede variar dependiendo del tipo celular que le dio origen, así como también en distintos estados patológicos. A pesar de haber sido descubiertos en 1981, se les han dado pocos usos fuera del campo de investigación, ya que su obtención y aislamiento presentan diversos desafíos. A saber, el método gold standard de aislamiento y enriquecimiento es la ultracentrifugación, que comprende varias etapas y requiere de equipamiento de alto costo no disponbles en laboratorios de análisis clínicos. Además, no logra evitar la formación de agregados proteicos por la presencia de la proteína de Tamm-Horsfall que reduce el porcentaje de recuperación, impide que sea reproducible y provoca que los exosomas se cntaminen con otros tipos de vesículas extracelulares. Otras alternativas a la ultracentrifugación para el aislamiento de exosomas son: la separación por gradiente de densidad, un método de múltiples pasos en el que generalmente se obtienen exosomas acompañados de lipoproteínas de alta densidad y los Kits comerciales ofrecidos por empresas internacionales con una elevada tasa de costo/determinación difícilmente costeable por nuestro sistema de salud.

En este escenario, mediante un proyecto de vinculación interdisciplinaria en colaboración con el Instituto de Nanociencia y Nanotecnología (INN, CNEA Bariloche), el Servicio de Nefrología Experimental y Bioquímica Molecular (IDIM, UBA-CONICET) y el Laboratorio de Biología Molecular (BioCyM, Universidad Juan Agustín Maza) estamos desarrollando un método de separación y concentración de exosomas basada en su reconocimiento por parte de nanopartículas magnéticas funcionalizadas con un aptámero de ADN con capacidad de unión a la tetraspanina CD63, proteína expresada en la membrana exosomal. El método desarrollado podrá utilizarse en un paso posterior para el estudio de marcadores en nefropatías proliferativas. A su vez, se trata de un método escalable para su utilización en otras patologías proliferativas como el cáncer.

 

PUBLICACIONES 

  1. Rosenberg ML, Yaneff A, Ferradás GM, Villafañe-Tapia MP, Davio CA, Goette NP, Vlachovsky SG, Peroni RN, Oddo EM, Azurmendi PJ. Urinary Total and Extracellular Vesicles cAMP Content Are Associated with Autosomal Dominant Polycystic Kidney Disease (ADPKD) Progression. Life 2023, 13, 1817. https://doi.org/10.3390/life13091817.
  2. Quijia CR, Quevedo-Enríquez SA, Zappia CD, Peroni RN, Chorilli M. Administration of inhibitory molecules in nanoparticles in breast cancer therapy. Current Medicinal Chemistry journal. Curr Med Chem. 2023 doi: 10.2174/0929867330666230608145125. PMID: 37291791.
  3. Minoia JM, Filia MF, Roma MI, De Fino FT, Copello GJ, Peroni RN. Selective modulation of placental and fetal MDR transporters by chronic in utero exposure to NRTIs in Sprague-Dawley rats: importance for fetoprotection. Toxicol Appl Pharmacol. 2022, 450, 116170.
  4. Roma MI, Schiariti Lampropulos VE, Ayllón-Cabrera I, Salazar Sanabria AN, López Nigro MM, Peroni RN*, Carballo MA. Modulation of hepatic ABC transporters by Eruca vesicaria intake: Potential diet-drug interactions. Food and Chemical Toxicology 2019, 133 *última autoría compartida
  5. López Nigro MM, Peroni RN*, Ayllón-Cabrera I, Schiariti Lampropulos VE, Roma MI, Carballo MA. In vivo antigenotoxic activity of Diplotaxis tenuifolia against cyclophosphamide-induced DNA damage: Relevance of modulation of hepatic ABC efflux transporters. Mutat Res Genet Toxicol Environ Mutagen. 2018, 836(Pt B):72-78. *primera autoría compartida
  6. Andrea M. Mebert, Gisela S. Alvarez, Roxana Peroni, Corinne Illoul, Christophe Hélary, Thibaud Coradin, Martin F. Desimone. Collagen-silica nanocomposites as dermal dressings preventing infection in vivo. Materials Science & Engineering C. 2018, 93:170-177.
  7. Gantner ME, Peroni RN, Morales JF, Villalba ML, Ruiz ME, Talevi A. Development and Validation of a Computational Model Ensemble for the Early Detection of BCRP/ABCG2 Substrates during the Drug Design Stage. J Chem Inf Model. 2017 (8):1868-1880.
  8. Filia MF, Marchini T, Minoia JM, Roma MI, De Fino FT, Rubio MC, Copello GJ, Evelson PA, Peroni RN. Induction of ABCG2/BCRP restricts the distribution of zidovudine to the fetal brain in rats. Toxicol Appl Pharmacol. 2017; 330:74-83.
  9. Carballo MA., Roma MI, Ayllón-Cabrera I, López Nigro MM, Peroni RN. "Chronic intake of wild rocket leaf juice-. Antigenotoxic effect and modulation of hepatic ABC efflux transporters". Abstracts/Toxicology Letters 2595, 2016 S73-S247
  10. Roma MI, Hocht C, Chiappetta DA, Di Gennaro SS, Minoia JM, Bramuglia GF, Rubio MC, Sosnik A, Peroni RN. Tetronic® 904-containing polymeric micelles overcome the overexpression of ABCG2 in the blood-brain barrier of rats and boost the penetration of the antiretroviral efavirenz into the CNS. Nanomedicine (Lond). 2015 (15):2325-37.
  11. Peroni RN, Abramoff T, Neuman I, Podestá EJ, Adler-Graschinsky E. Phytoestrogens enhance the vascular actions of the endocannabinoid anandamide in mesenteric beds of female rats. Int J Hypertens. 2012; 2012:647856.
  12. Peroni, RN. Influencia de la proteína de resistencia al cáncer de mama (BCRP) en la farmacocinética de los antirretrovirales. Rev. Farm. vol. 153 nº 1-2: 91-102, 2011.
  13. Peroni RN, Di Gennaro SS, Hocht C, Chiappetta DA, Rubio MC, Sosnik A, Bramuglia GF. Efavirenz is a substrate and in turn modulates the expression of the efflux transporter ABCG2/BCRP in the gastrointestinal tract of the rat. 2011, 82(9):1227-33.
  14. Orliac ML, Peroni RN, Abramoff T, Neuman I, Podesta EJ, Adler-Graschinsky E. Increases in vanilloid TRPV1 receptor protein and CGRP content during endotoxemia in rats. Eur J Pharmacol. 2007 ;566 (1-3):145-52.
  15. Peroni RN, Orliac ML, Abramoff T, Ribeiro ML, Franchi AM, Adler-Graschinsky E. Participation of CGRP and prostanoids in the sex-linked differences of vascular anandamide effects in mesenteric beds of Sprague-Dawley rats. Eur J Pharmacol. 2007, 557(1):49-57. ISSN:00142999 FI2007: 2,853
  16. Peroni RN, Orliac ML, Becu-Villalobos D, Huidobro-Toro JP, Adler-GraschinskyE, Celuch SM. Sex-linked differences in the vasorelaxant effects of anandamide invascular mesenteric beds: role of oestrogens. Eur J Pharmacol. 2004;493(1-3):151-60.
  17. Orliac ML, Peroni R, Celuch SM, Adler-Graschinsky E. Potentiation of anandamide effects in mesenteric beds isolated from endotoxemic rats. J Pharmacol Exp Ther. 2003, 304(1):179-84.

 

CAPÍTULOS DE LIBROS

“Discovering new antiepileptic drugs addressing the transporter hypothesis of refractory epilepsy. Ligand-based approximations”, by Couyupetrou M, Di Ianni ME, Gantner ME, Pesce G, Peroni R, Bruno-Blanch LE & Talevi A, 2012. Antiepileptic Drug Discovery Novel Approaches.

 

FUENTES DE FINANCIAMIENTO

NACIONALES

  1. PICT 2021-I-0155 “Desarrollo y validación de un método magnético costo-efectivo y reproducible de aislamiento de exosomas urinarios para aplicaciones en patologías renales proliferativas a nivel clínico”. Dirección: Roxana Peroni
  2. Instituto Nacional del Cáncer, Ministerio de Salud DI-2020-85013845-APN-INC#MS. “Desarrollo de nanopartículas magnéticas para el tratamiento de tumores de mama resistentes a las terapias convencionales. Dirección: Alejandro Berra, Codirección: Roberto Zysler. Investigadora participante: Roxana Peroni
  3. PICT 2018-D-02279 “Estudio clínico-molecular de la participación de los transportadores OATP41C y MRP4 en la progresión de la poliquistosis renal autosómica dominante y su correlación con las concentraciones urinarias de AMPc: Búsqueda racional de nuevos blancos terapéuticos”. Dirección: Roxana Peroni

INTERNACIONALES

  • NESTOR Project, "Nanomaterials for Enzymatic Control of Oxidative Stress Toxicity and Free Radical Generation"; 101007629 MSCA-RISE 2020 – Marie Skłodowska-Curie Research and Innovation Staff Exchange (RISE), European Union. https://nestor.unizar.es/

 

COLABORACIONES

INTERNACIONALES

  • Dr. Gerardo Goya. Instituto de Nanociencia y Materiales de Aragón, Universidad de Zaragoza, España.
  • Dra. Bojana Segura, Instituto Nacional de Biología, Liubliana, Eslovenia.
  • Dra. Vittoria Raffa, Departamento de Biología, Universidad de Pisa, Italia. 

 

NACIONALES

  • Roberto Zysler y equipo. Instituto de Nanociencia y Nanotecnología - INN-CNEA Bariloche-CONICET
  • Pablo Azurmendi y equipo. Servicio de Nefrología Experimental y Bioquímica Molecular. Instituto Investigaciones Médicas Alfredo Lanari- UBA-CONICET
  • Marta Carballo y equipo. INFIBIOC-Instituto de Fisiopatología y Bioquímica Clínica, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires.
  • Ana Vanesa Torbidoni. Laboratorio de Biología Molecular (BioCyM), Instituto Argentino de Veterinaria, Ambiente y Salud (IAVAS), Universidad Juan Agustín Maza.